刘雨晴 , 许亚男 , 孟大伟 , 刘璐 , 金太成 , 周晓梅 , 杨丽萍

1吉林师范大学生命科学学院, 四平, 136000; 2吉林省植物资源科学与绿色生产重点实验室, 四平, 136000
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2017 年, 第 15 卷, 第 109 篇   
收稿日期: 2016年12月29日    接受日期: 2016年10月13日    发表日期: 2016年12月13日

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利用农杆菌介导的叶盘转化法进行的烟草（Nicotiana benthamiana L.）遗传转化技术已经被广泛应用。蚜传辅助因子(helper component-proteinase, HC-Pro)是一种RNA沉默抑制子，为了研究HC-Pro蛋白的功能，本文采用农杆菌介导的烟草（Nicotiana benthamiana L.）叶盘转化法将外源基因HC-Pro转化烟草。并优化了农杆菌重悬液的浓度，选择培养基中卡那霉素的浓度和生根培养基中活性炭的比例。此外，本文介绍了一种简单而有效的生根技术—水培生根法，并利用这种技术快速获得了HC-Pro转基因株系。半定量RT-PCR（Reverse transcription-PCR）检测结果表明，HC-Pro在转基因烟草及转基因后代植株中稳定表达。

烟草； 叶盘转化法；RNA沉默抑制子；蚜传辅助因子